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Collagenase/Dispase® (100mg)

von Merck
126,00 €
SKU 10269638001

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Allgemeine Beschreibung

Dispase ist eine neutrale, schnell wirkende, sanfte Protease, die die intakte Epidermis von der Dermis trennt. Außerdem trennt sie intakte kultivierte Epithelzellen von der Trägerschicht (Substratum). Sie spaltet die Basalmembranzone und die Epithelzellen bleiben intakt. Collagenase ist eine Protease, die das Dreifachhelix-Protein Collagen spaltet. Es gibt drei Arten von Gewebecollagenasen, die zur Familie der Matrix-Metallproteinasen (MMP) gehören. Collagenase aus Clostridium histolyticum weist eine sehr starke Aktivität auf, da es Collagen von beiden Enden bei Temperaturen von nur 4-10 °C verdaut.

Spezifität

Collagenase baut natives Collagen ab. Dispase® ist eine unspezifische Protease.

Anwendung

Collagenase/Dispase® wird zur Präparation von Zellen aus vielen verschiedenen Geweben und Organen verwendet.

Komponenten

EC 3.4.24.4 & 3.4.24.3

Einheitendefinition

Eine Einheit ist die Enzymaktivität, die unter Assaybedingungen innerhalb 1 Minute Folin-positive Aminosäuren und Peptide freisetzt, die 1 mol Tyrosin entsprechen.

Angaben zur Herstellung

Aktivator: Ca2+

Arbeitskonzentration: Ca. 1 mg/ml (Collagenase: 0,1 U/ml, Dispase: 0,8 U/ml)

Enzymaktivität:
Collagenase: 0,1 U/mg (nach Wünsch) Lyophilisat (+25 °C, 4-Phenyl-azobenzyl-oxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg als Substrat)
Dispase®: 0,8 U/mg (nach Wünsch) Lyophilisat (+37 °C, Casein als Substrat, pH 7,5)
Kontaminierende proteolytischen Aktivitäten: <0,1 U/mg Lyophilisat (Hämoglobin als Substrat)

Arbeitslösung: Vorbereitung der Arbeitslösung Enzym in Wasser lösen, auf eine Endkonzentration von 100 mg/ml. Mit PBS (Ca2+/Mg2+-frei) auf eine Endkonzentration von 1 mg/ml verdünnen und durch einen sterilen 0,2-μm-Membranfilter filtrieren.
Enzymkonzentration der sterilen Lösung: Collagenase, 0,1 U/ml PBS; Dispase®, 0,8 U/ml PBS.

Inhibitoren:
Collagenase-Inhibitoren: EDTA, EGTA
Collagenase/Dispase wird durch Serum nicht gehemmt.

Lagerbedingungen (Arbeitslösung): -15 bis -25 °C
Die rekonstituierte Lösung ist bei -15 bis -25 °C stabil.
Hinweis: In geeigneten Aliquoten aufbewahren und wiederholtes Einfrieren und Auftauen vermeiden.

Rekonstituierung

Rekonstitution in Wasser (100 mg/ml). Weiter Verdünnung mit PBS (phosphatgepufferter Kochsalzlösung) (Ca2+/Mg2+-frei).

Sonstige Hinweise

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.
Collagenase aus Vibrio alginolyticus, Dispase® aus Bacillus polymyxa

Rechtliche Hinweise

Dispase is a registered trademark of Godo Shusei Co., Ltd.